乙肝病毒cccDNA检测可作为评价抗病毒治疗的新指标

        第二军医大学长征医院缪晓辉报告，共价闭合环状DNA(cccDNA)是乙肝病毒前基因组RNA复制的原始模板，虽然其含量较少，每个肝细胞内只有约5～50个拷贝，但对乙肝病毒的复制以及感染状态的建立具有十分重要的意义，只有清除了细胞核内的cccDNA，才能彻底消除乙肝患者病毒携带状态，是抗病毒治疗的目标。检测乙肝病毒cccDNA的临床意义包括：

        一.cccDNA可作为评价抗乙肝病毒药物的新指标。目前临床上评价干扰素、核苷类似物这些抗乙肝病毒药物时存在一个很大的问题，即其评价指标主要是患者肝功能的改善与否、血清乙肝病毒DNA水平的变化以及肝组织的病理学改变等。诚然，这些指标对临床医师判断患者病情而言非常重要和实用，也是临床医师选用抗乙肝病毒药物时的依据。然而对于何时停用抗病毒药物、停用抗病毒药物后乙肝病毒是否会重新复制活跃导致乙肝复发，则缺乏客观而有效的指标。开展肝细胞内乙肝病毒cccDNA的动态定量监测可以部分解决这个问题。治疗前后肝细胞内乙肝病毒cccDNA含量的变化应该纳入到抗乙肝病毒药物评价的指标体系中来，从一定意义上说，只有能够彻底清除乙肝病毒cccDNA的药物，才能算是真正“有效”的抗病毒药物。

        二.检测乙肝病毒cccDNA可作为评价抗乙肝病毒是否能感染肝外组织的客观指标之一。乙肝病毒不仅仅是一种嗜肝病毒，一些肝外组织中也可检测到乙肝病毒DNA，如肾脏、胰腺以及外周血单个核细胞(PBMC)等。

        三.检测乙肝病毒cccDNA可评价乙肝患者病情。缪晓辉等用选择性荧光定量PCR对93例乙肝患者血清作回顾性分析时，发现24例患者血清cccDNA呈阳性，其中慢性乙肝中度以上的病例占70%以上。虽然经过统计学分析还不能看出显著差异，样本量还不够大，血清cccDNA阳性与病情的轻重是否存在某种关系还有待于进一步的深入研究；但是，从理论上推测，既然存在于肝细胞胞质和线粒体中的转氨酶等酶类在肝细胞被破坏时能释放到血液中，那么存在于肝细胞核内的cccDNA分子在肝细胞变性、坏死时应该也可以释放到血液中，而且病情越严重，变性坏死的细胞越多，对于同一例患者而言，在某一时间段内，其血液中的cccDNA水平应该也相应地越高，对判断病情有意义。目前通过肝活检来监测乙肝患者肝组织中的cccDNA水平变化存在着一定困难，因而监测血液中cccDNA的动态变化也许更具有现实意义。当然，目前还存在一些问题有待研究和解决，例如血液中的水平远远低于肝组织中的水平，也远远低于血液中的松弛环状DNA(rcDNA)水平，因此必须进一步提高cccDNA定量检测的灵敏度。