荧光定量pcr仪 肝炎
荧光定量pcr仪 肝炎
你是乙肝患者,还是乙肝病毒健康携带者,你身上的乙肝病毒传染性究竟有多大?……这些,都可通过PCR荧光定量技术进行诊断。”对着一台其貌不扬的DNA合成仪,达安基因诊断中心副总经理周新宇介绍说,合成仪先合成带有病毒特征的DNA片段,再通过纯化制成PCR荧光探针,利用这些探针,4个小时内便可从病人的几滴血中检测出患者的病况。
PCR技术,即基因体外扩增技术,1988年在美国已开始研究,1993年获诺贝尔奖,它通过模拟细胞内的天然DNA复制过程,在几个小时内将基因分子扩增至千万乃至上亿倍,从而证实与疾病相关的某种基因的存在,达到迅速诊断效果。
自第一代PCR技术进入中国以来,我国经历了一个由爆炸性展开到暂停使用的曲折过程。第一代的PCR技术(常规PCR)有种种不足之处,由于它在全开放状态下,容易造成污染,病毒细菌“张冠李戴”,使人无辜患上“假阳性”,况且也不能解决人体病毒的定量问题。因此,我国1998年已明文规定停止常规PCR检测的使用。
达安基因诊断中心并没有被挫折吓退,早在1996年就已作出前瞻性的决策,研制开发了荧光探针定量PCR诊断试剂盒,被列为国家九五重点攻关项目,先后获得科技贷款3200多万元。1999年12月,该中心的“乙肝病毒荧光PCR诊断试剂盒”获得国家二类新药证书和试生产批本,填补了我国这方面的空白。1999年2月,该公司已就荧光定量PCR技术向国家申请专利,6月获准提前公开;目前正在申请香港专利。
荧光定量PCR技术的原理并不复杂,它是在常规PCR基础上添加了带有荧光基因的探针。如果病人血液的扩增产物与带有病毒的探针进行DNA杂交,能够相结合的,探针就会发亮,证明人体本身含有探针所有的病毒。而荧光信号的强弱变化就可测出人体感染什么病菌、数量多少,会不会对他人造成伤害。荧光定量PCR技术的整个操作过程在完全封闭的状态下进行,既避免了“假阳性”,又可测出人体内病毒的含量,是目前我国最先进的基因诊断技术。
“因为这项技术准确度高,且较容易在临床上推广使用,其意义非比寻常。比如,我国是乙型肝炎大国,乙肝病毒阳性携带者占人口10%,PCR荧光定量技术的应用,在临床上有很高的价值。”周新宇说。
据悉,PCR荧光探针定量试剂盒适用于检测肝炎、结核病、皮肤病、性病、肿瘤、遗传病等许多疾病,便利快捷。结核病人用显微镜检测至少要5至8周,而传统PCR方法确诊肝炎的“两对半”检验要3天才能有结果,“试剂盒”只需4小时就可以了。
利用这项技术,可在临床上没有症状、疾病仍处潜伏期时就能发现疾病,尤其对于传染病的早期诊断治疗非常有意义。此外,这项技术对病菌数量的确定,使病人可以知道自己需不需要用药,该用些什么药,用药之后效果如何,之后该换哪些药继续服用等等。这既能指导临床用药,又能避免用药浪费。
PCR技术在遗传疾病的检测上也有举足轻重的作用,如对地中海贫血,通过对父母基因检测就可以知道小孩得病的可能性有多大。另外,还可以通过检测胎儿,来诊断胎儿是否为畸胎,这对于提高我国人口质量有着非常重大的社会意义。
据介绍,该中心已经研制出肝炎和结核等10余种常见病原体诊断试剂盒投入临床使用,近20种正在研究开发。至1999年底止,它已和全国200多家医院建立了合作关系,为医院提供诊断试剂、技术支持等。医院只需购买一部扩增仪就可以使用他们的荧光探针来对病人进行诊断治疗。另外,他们还开展远程诊断系统及染色体检验配套诊断试剂盒的研究应用,收到了与荧光PCR诊断技术相得益彰的效果。
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