原发性胆汁性肝硬化药物治疗后的相关免疫学变化

　　目的：

　　前瞻性研究熊去氧胆酸（ursodeoxyeholic acid，UDCA）、LDCA联合泼尼松龙两种治疗方案对原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis，PBC）的治疗效果，分析PBC患者肝脏生化指标、血清免疫球蛋白、外周血淋巴细胞亚群、细胞因子、抗线粒体抗体（anti-mi tochondrial antibody，AMA）、抗M2亚型的抗线粒体抗体（AMA-M2）、抗GP210抗体和抗SP100抗体的临床相关性及其在两药物治疗后的变化特点。

　　方法：

　　30例PBC患者（男1例，女29例，年龄由33至72岁，平均年龄52.33±8.77岁），均已接受UDCA（20人）或UDCA联合泼尼松龙（10人）治疗至少2年。根据当前治疗方案分为UDCA组（U组，20人）和LJDCA联合泼尼松龙组（UP组，10人），PBC患者入选标准符合美国肝脏病学会2000年制定的PBC诊疗指南；入选研究患者签署知情同意书。治疗药物剂量为UDCA 13-15mg/kg/d；泼尼松龙起始剂量0.5mg/kg/d，4周开始减量，减至7.5mg/d时维持。于治疗前采集详细的临床及实验室资料，在治疗后第3、6、24月随访病人，动态检测肝脏生化指标（包括ALT、AST、GGT、ALP、TBIL、DBIL、TBA、ALB），白细胞计数（WBC），血清IgG、IgA、IgM，外周血淋巴细胞亚群（包括B细胞、NK细胞、T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞、CD4+CD28+T细胞、CD4+CD28-T细胞、CD8+CD28+T细胞、CD8+CD28-T细胞、CD4+CD25+T细胞）、血清细胞因子（包括TNF-α、IL-1 β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10）及自身抗体（AMA、AMA-M2、抗GP210抗体、抗SP100抗体）的水平。

　　结果：

　　u组和UP组患者在治疗后肝生化指标ALT（分别为P=0.001和P=0.016）、AST（U组P=0.009）、ALP（UP组P=0.018）、GGT（UP组P=0.027）均有所下降。治疗后3个月时，U组ALT、ALP下降迅速且明显低于UP组（分别为P：0.016和P=0.039），此后差异消失。不同治疗组PBC患者血清IgG、IgA、IgM水平，外周血白细胞计数以及淋巴细胞亚群在治疗前后均无明显变化（P>O.05）。不同治疗组。PBC患者血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IL-1β水平都随治疗时间的延长而降低，尤其在治疗后24个月以上时下降最为明显（P<0.05）。自身抗体检测结果显示，30例患者中AMA阳性率90％；AMA-M2阳性率73.33％；血清AMA滴度、AMA-M2水平在治疗后无明显改变（P>0.05）。抗GP210抗体和抗SP100抗体表达阳性率分别为33.3％和16.67％。抗GP210抗体阴性组PBC患者的ALT、AST、ALP和IgM指标随着治疗时间的延长而逐渐降低（分别为P=0.000，P=0.000，P=0.014，P=0.039）。抗SPl00抗体阴性组患者ALT、AST、ALP和GGT在治疗后明显降低（分别为P=0.007，P=0.015，P=O.005，P=0.048）。相关性分析显示，PBC患者肝脏ALT、AST、ALP和GGT指标与细胞因子IL-1β，IL-2，IL-6，IL-4，1L-10等指标间均具有不同程度正相关（P<0.05）。细胞因子IL-1β和IL-10水平与淋巴细胞比例、CD8+CD28+T细胞比例之间均具有较好的正相关，与CD8+CD28-T细胞比例之间呈较好的负相关（P<0.05）。抗GP210抗体水平与AST、DB、TBA、IgA、IgM之间均呈明显的正相关（P<0.05），抗SP100抗体与IgG水平之间均呈现较好的负相关（P<0.05）。

　　结论：

　　1、UDCA单药治疗和UDCA与泼尼松龙的联合治疗均可缓解PBC患者部分异常的肝脏生化指标，在考虑治疗副作用的情况下UDCA单药治疗仍为PBC的首选方案；

　　2、两种治疗方案对PBC患者外周血中免疫球蛋白、Th1、Th2型T淋巴细胞，CD8+CD28-调节T细胞、CD4+CD25+调节T细胞、NK细胞和B细胞均无明显调节作用；

　　3、两种治疗方案均有缓慢抑制Th1型细胞因子IL-2表达的作用，IL-2水平低表达可抑制T淋巴细胞的活化效应；

　　4、两种治疗方案均有缓慢抑制PBC患者。Th2型细胞因子IL-4、IL-6、IL-10水平的作用，这类细胞因子水平下降可降低对B细胞活化效应，抑制过高的体液免疫反应对自身组织的损伤；

　　5、两种治疗方案均能缓慢抑制PBC患者炎性细胞因子TNF-α与IL-1β水平的表达，PBC患者Th2型细胞因子与炎性细胞因子水平的降低，可抑制患者体内单核巨嗜细胞增殖活化，缓解患者肝脏内小叶间胆管的免疫炎症病理损伤；

　　6、血清AMA、AMA-M2是PBC患者标志性抗体，但与病情轻重无关；抗GP210抗体与与PBC患者病情相关，可用于评估疾病严重度；抗GP210抗体和抗SP100抗体阳性的患者对药物治疗反应不佳，提示它们对于预测药物疗效有一定临床价值。